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Método de eliminación de restos celulares.

Hay muchos fragmentos celulares después de la lisis mecánica de la suspensión celular.¿Cómo eliminar estos fragmentos?Echemos un vistazo a los distintos enfoques:

1. Utilice el método de dilución.Cuando las células se diluyen, también pueden proliferar, serán cada vez más numerosas y, en consecuencia, los restos celulares serán cada vez menos.
2. También hay asentamientos naturales.Las células se asientan más rápido que la mayoría de los fragmentos: : Mueva la suspensión celular altubo centrífugo, y cuando la mayoría de las células se hunden, la solución superior se puede succionar y luego agregar a la solución de cultivo para suspender las células.Este método se puede utilizar repetidamente, mientras que cada vez puede observar si cumple con sus requisitos bajo el microscopio.
3. Centrífuga de baja velocidadPuede eliminar residuos, generalmente 700 g, 5 minutos.
4. Al centrifugar, bajo la condición de que la cantidad de células sea suficiente, reduzca el tiempo de centrifugación, como 5 minutos, 1000 rpm, en lugar de 3 minutos, 1000 rpm, y elimine el sobrenadante, ¡porque generalmente hay necrosis y desechos en el sobrenadante!¡Esta operación sólo debe realizarse una vez durante el proceso de lavado antes de la incubación!

Aunque hay muchas formas de eliminar los restos celulares, descubrirá que la centrifugación es uno de los métodos más eficientes.

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Y debido a que los tejidos y células vegetales tienen paredes celulares compuestas de celulosa, hemicelulosa y pectina, generalmente es necesario moler arena de cuarzo o polvo de vidrio con una solución de extracción adecuada o tratar con celulasa para lograr el propósito.La fragmentación de las células bacterianas es más difícil, porque todo el esqueleto de la pared celular bacteriana es en realidad un enlace covalente de macromoléculas quísticas de peptidoglicano, muy resistentes.Los métodos comunes para romper las paredes celulares bacterianas incluyen trituración ultrasónica, molienda con arena, extrusión a alta presión o tratamiento con lisozima.Una vez que se rompen el tejido y las células, se selecciona el tampón apropiado para extraer la proteína deseada.Los materiales insolubles, como fragmentos celulares, se eliminan mediantecentrífugoo filtración.

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Hora de publicación: 24-jul-2023