El cultivo de pase celular se refiere al proceso de dividir el cultivo en partes pequeñas y reinocularlo en otro recipiente de cultivo (botella) para su posterior cultivo.Agitador de células de alta eficienciaes un consumible común para el cultivo de células en suspensión, entonces, ¿cómo utilizar un agitador de células de alta eficiencia para el paso de células?
Por su naturaleza, las células en suspensión no son adherentes, por lo que no se necesitan enzimas para desprenderlas de la superficie del agitador de alta eficiencia.En el laboratorio general, se utilizan habitualmente el paso directo y el paso centrífugo para realizar el paso de células en suspensión.Cuando se observa que las células tienen entre un 80 y un 90 por ciento de crecimiento excesivo (la suspensión celular se vuelve amarilla), las células están listas para pasar.
Si las células crecen bien bajo el microscopio, se puede utilizar el pase directo.El medio en elmatraz agitador de alta eficienciaSe dividió proporcionalmente en el nuevo matraz de cultivo y se añadió el medio fresco.La densidad celular se observó al día siguiente para determinar si se necesitaba el líquido.
Si el estado de la celda es malo, se debe utilizar el método de paso centrífugo.En primer lugar, la suspensión celular se transfiere altubo centrífugo, se centrifuga a 1000 rpm durante 5 min, luego se descarta el sobrenadante, los precipitados celulares se dispersan suavemente y las células se resuspenden con medio fresco.Finalmente, se absorbe la cantidad adecuada de suspensión celular con una pajita, se coloca en un nuevobotella de cultivoy se añade la cantidad adecuada de medio fresco.Continuar cultivando.
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Hora de publicación: 18-abr-2023